更新時間:2021-07-21
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試劑盒保溫:
① ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么 ELISA 反應總是需要一定時間的溫育。
② 溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和 4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立 ELISA 方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在 37℃經(jīng) 1-2 小時,產(chǎn)物的生成可達ding峰。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在 43℃進行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應 4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成多的沉淀。但因所需時間太長,在小鼠c-fosELISA檢測試劑盒中一般不予采用。
elisa試劑盒保存條件:
1 ) 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2 ) 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意事項:
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡
2. 洗滌進程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性
3. 一次加樣時刻控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔
5. 如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,核算時請乘以稀釋倍數(shù)
6. 在制造標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液制造,不能混雜
7. 底物請避光保存
8. 小鼠c-fosELISA檢測試劑盒不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑
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