ELISA隱秘要點(diǎn)之保溫:
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反響,即加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,此刻反響的溫度和時(shí)刻應(yīng)按規(guī)則的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度敏捷平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為防止蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱簡單。
常有ELISA操作者抱怨試驗(yàn)復(fù)雜,而經(jīng)驗(yàn)豐富的老師們會覺得很簡便,一是熟能生巧,二是把握了其間的隱秘。今日上海通蔚生物帶您來看哪些個(gè)高品質(zhì)ELISA試劑盒的操作隱秘吧:
ELISA隱秘要點(diǎn)之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的性,此刻應(yīng)該運(yùn)用相同口徑的滴管,保持的加樣姿勢,使每滴液體的體積根本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,防止加在孔壁上部,并留意不可出現(xiàn)氣泡。
ELISA隱秘要點(diǎn)之洗刷:
洗刷在ELISA試劑盒過程中不是反響聚,但卻是決議試驗(yàn)勝敗的關(guān)鍵。洗刷的目的是洗去反響液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反響過程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。洗刷如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。別的,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體效果而產(chǎn)生攪擾。
ELISA板的洗刷一般可采用以下方法:
1.吸干孔內(nèi)反響液;
2.將洗刷液注滿板孔;
3.放置2min,略作搖擺;
4.吸干孔內(nèi)液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗刷的次數(shù)一般為3~4次,有時(shí)乃至需洗5~6次。
ELISA試驗(yàn)操作示意圖:
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